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產(chǎn)品詳情

GL1251 革蘭陰性菌裂解緩沖液

  • 產(chǎn)品/服務(wù):GL1251 革蘭陰性菌裂解緩沖液
  • 型 號(hào):GL1251
  • 品 牌:百奧萊博
  • 單 價(jià):面議 
  • 更新日期:2023-05-31
  • 有效期至:長(zhǎng)期有效
  • 瀏覽次數(shù):1095
產(chǎn)品簡(jiǎn)介

革蘭陰性菌裂解緩沖液由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供,用于科研目的,革蘭陰性菌裂解緩沖液是我司眾多優(yōu)質(zhì)RNA提取純化之一,質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品,價(jià)格非常優(yōu)惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購(gòu)。...

產(chǎn)品詳細(xì)介紹

特別提示:包括革蘭陰性菌裂解緩沖液在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!


產(chǎn)品名稱:革蘭陰性菌裂解緩沖液
產(chǎn)品貨號(hào):GL1251
產(chǎn)品規(guī)格:100ml

用途:
裂解細(xì)菌(革蘭陰性菌)中提取RNA

注意事項(xiàng):
主要由Tris-HCl、EDTA、SDS、氯化鈉組成。

儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月

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名稱:植物RNA提取試劑盒2.0(無(wú)lǜ仿柱式提取)
貨號(hào):BTN160907
規(guī)格:50次
本試劑盒是無(wú)酚無(wú)lǜ仿柱式植物RNA提取試劑盒(BTN160906)的升級(jí)產(chǎn)品。不僅不需要lǜ仿處理,還解決了提取的植物總RNA中出現(xiàn)基因組DNA污染這一難題,提取的RNA通過(guò)PCR驗(yàn)證不含基因組DNA污染。

試劑盒特點(diǎn):
1. 免酚和lǜ仿處理,操作安全可靠。
2. 簡(jiǎn)單快速,處理一個(gè)樣品只需要約十分鐘。
3. RNA 純度更高,平均 OD260/280一般都在2.0左右,能夠有效去除大多數(shù)植物中的多糖污染。
4. 目前已測(cè)試過(guò)上百種植物。
5. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern雜交、cDNA 合成等實(shí)驗(yàn)。
6. 高于進(jìn)口的柱式植物RNA提取產(chǎn)品。

試劑盒組成:
成分 規(guī)格
溶液A 50ml
溶液B 50ml
離心吸附柱 50套
通用洗柱液 100ml
膜反應(yīng)液 2.5ml
RNase-free DNase(1U/μL) 0.5ml
RNA洗脫液 10ml


儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸,4℃保存,DNase低溫運(yùn)輸保存,有效期一年。

使用方法:
1. 估算組織細(xì)胞的用量。每次微量提取一般需要100-200mg植物葉片、或50-100mg植物種子、或200-500mg植物果實(shí)。
2. 先將新鮮植物組織剪切成小塊(保存在RNA保存液中的植物組織需用紙吸去RNA保存液體后再剪切成小塊),放入10-15mL塑料離心管中,加入1mL溶液A,然后用勻漿器勻漿5-20秒。勻漿時(shí)會(huì)產(chǎn)生泡沫,但不影響提取效果。也可以使用液氮硯磨法破碎植物組織,硯磨完后加入1mL溶液A。
注意:溶液A在4℃放置后可能會(huì)產(chǎn)生沉淀,使用前必須放在65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用。
3. 將勻漿物或硯磨物轉(zhuǎn)移至干凈的1.5mL塑料離心管中(可以不必轉(zhuǎn)移非液體的細(xì)胞碎片)。有的植物組織(比如果實(shí))含有大量水份,勻漿液會(huì)多于1mL,轉(zhuǎn)移時(shí)也只取1mL。
4.室溫12000~15000g離心3~5分鐘,管底沉淀為細(xì)胞破碎物。
5. 將上清液(約0.6mL)轉(zhuǎn)移到另一干凈的1.5mL塑料離心管中。
6. 加入等體積的溶液B,充分顛倒混勻。如果有沉淀產(chǎn)生(對(duì)某些植物,屬于正常現(xiàn)象),千萬(wàn)不要去掉沉淀,一定要把所有的混合物上柱。
7. 將一半的溶液(如果有沉淀,則先混勻)轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,13000-15000g室溫離心半分鐘,棄穿透液。
8. 將剩下的一半溶液(如果有沉淀,則先混勻)轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中,13000-15000g室溫離心半分鐘,棄穿透液。
9. 加0.7mL 通用洗柱液,室溫離心半分鐘,棄穿透液。再加0.3mL 通用洗柱液,室溫離心半分鐘,棄穿透液。一般樣品如此洗滌兩次即可,但如果在第7 步加入溶液B后有沉淀產(chǎn)生,則需要洗三次,每次加入的通用洗滌液的量分別為0.4、0.3和0.3mL。
10. 12000rpm室溫離心10秒以便去除殘留液體。此步很重要,否則殘留的通用洗柱液會(huì)抑制后續(xù)反應(yīng)中DNase的活性。
11. 將10μl(10 U)的RNase-free DNase 加入到50μl 37℃預(yù)熱的DNA膜反應(yīng)液中,吹打混勻配制成DNase工作液。
12. 將DNase工作液在37℃預(yù)熱1分鐘,然后全部加入到離心吸附柱中,室溫放置5分鐘。注意:5分鐘一般足夠降解大多數(shù)情況下的DNA污染。如果DNA 沒(méi)有徹底降解(可能由于樣品中殘留的雜質(zhì)抑制了DNase的活性),此步的保溫時(shí)間可以適當(dāng)延長(zhǎng)到10分鐘或15分鐘。
13. 直接在離心吸附柱中加0.7mL 通用洗柱液,蓋上蓋后顛倒數(shù)次混勻。
14. 12000rpm室溫離心半分鐘,棄穿透液。
15. 再加0.3mL 通用洗柱液到離心吸附柱中,12000rpm室溫離心半分鐘,棄穿透液。
16. 12000rpm室溫離心半分鐘。此步十分重要,否則殘留的乙醇(通用洗柱液中的成分)會(huì)影響RNA的使用。
17. 將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到RNase-free 收集管中,加入30-50μl RNA洗脫液,室溫放置1-2分鐘。
18. 13000-15000g室溫離心半分鐘,離心管中溶液即為RNA樣品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
19. RNA 完整性的電泳檢測(cè):如果需要做Northern雜交,強(qiáng)烈建議用戶使用甲醛變性膠進(jìn)行RNA電泳,因?yàn)榉亲冃阅z不能分離所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
20. RNA產(chǎn)量產(chǎn)率測(cè)定:將5-10μl RNA 溶于TE緩沖液中(pH7.5-8.2 之間)檢測(cè)其在OD260的光吸收。通過(guò)光吸收可以得出RNA濃度(1 OD260的RNA=40μg/mL),進(jìn)而計(jì)算出RNA的產(chǎn)量(濃度X 體積)和產(chǎn)率(RNA產(chǎn)量/組織用量)。
21. RNA 純度測(cè)定:無(wú)污染的總RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之間(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guān)),高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染,但一般不影響RT-PCR等反應(yīng)。

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