MT0113 熱敏尿嘧啶-DNA糖基化酶
產(chǎn)品簡介
北京百奧萊博供應(yīng)的熱敏尿嘧啶-DNA糖基化酶用于科研試驗,我公司專注于工具酶產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和供應(yīng),為您提供的熱敏尿嘧啶-DNA糖基化酶質(zhì)量可靠,批間差小,且價格公道,熱切盼望您選購我們的產(chǎn)品。...
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
特別提示:包括熱敏尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG酶)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:熱敏尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG酶)
英文名稱:Heatlabile Uracil DNA Glycosylase
產(chǎn)品貨號:MT0113
產(chǎn)品規(guī)格:100U|500U
本制品是來源于嗜冷海洋細(xì)菌經(jīng)大腸桿菌表達純化的的重組蛋白。該熱敏UDG酶能有效地水解單鏈或雙鏈 DNA 上的尿嘧啶,產(chǎn)生的缺嘧啶位點,在高溫或高 pH 下,易水解斷裂。該酶對RNA無活性,主要用于PCR擴增產(chǎn)物的防污染。大腸桿菌來源的尿嘧啶-DNA 糖基化酶較為耐熱,經(jīng)95℃10min處理仍會殘留有少量的尿嘧啶-DNA 糖基化酶活性,導(dǎo)致含有dU堿基的PCR產(chǎn)物的降解。而來源于嗜冷海洋細(xì)菌的熱敏UDG在50℃ 5min即完全失活,在進行PCR擴增前,在PCR混合液中添加尿嘧啶-DNA 糖基化酶(熱敏性),25℃10min即可消除PCR產(chǎn)物的殘留污染,由于尿嘧啶-DNA 糖基化酶(熱敏性)在PCR循環(huán)的94℃變性一步便可被滅活,因此不會影響新的含dU的PCR產(chǎn)物。
產(chǎn)品應(yīng)用:
· 去除單鏈或雙鏈DNA中的尿嘧啶堿基;
· 去除 PCR 殘存污染。
產(chǎn)品組成:
組分 | 100U | 500U |
熱敏UDG酶(1U/μl) | 100μl | 500μl |
儲存條件:-20℃,可保存2年,避免反復(fù)凍融。
可選試劑:Strong Taq DNA Polymerase(貨號:MT0022)
單位定義:在標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)體系下,37°C每分鐘催化 60 pmol 尿嘧啶從含尿嘧啶的雙鏈 DNA 上釋放所需要的酶量為一個活性單位。
反應(yīng)Buffer:本酶與大多數(shù)的PCR 聚合酶反應(yīng)緩沖液都是兼容的,但在高離子濃度(>100mM)下活性會受到抑制。
貯存液:20mM Tris-HCl,50mM NaCl,1mM DTT,50% Glycerol,0.1% (w/v) Triton X-100,pH 7.5。
熱失活:50℃,10min。
使用舉例:
1.配制反應(yīng)體系:
加入物 | 加入量 |
Strong Taq DNA Polymerase | 0.5μl |
dNTP Mixture(2.5 mM each) | 2μl |
10×Hi PCR Buffer | 5μl |
Heatlabile UDG(1U/μl) | 1μl |
Primers (10μM each) | 1μl |
Template DNA | 10ng-1μg |
DEPC-treated Water | 至50μl |
2.25℃孵育 10min。
3.正常啟動 PCR 程序。
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名稱:BspEI限制性內(nèi)切酶
貨號:SV0210
規(guī)格:5KU|1KU|500U
在不同反應(yīng)緩沖液的活性
BalbBuffer 1.1: <10%
BalbBuffer 2.1: 10%
BalbBuffer 3.1:
CutSmart Buffer: <10%
特性
重組酶、省時酶。
反應(yīng)條件
BalbBuffer 3.1,37℃。
熱失活:80℃ 20 分鐘。
濃度
10,000units/ml。
甲基化敏感性
對 dam 和哺乳動物 CpG甲基化敏感。
注意事項
BspEl是BspMll的完全同裂酶。
名稱:BsrBI限制性內(nèi)切酶
貨號:SV0220
規(guī)格:5KU|1KU|500U
在不同反應(yīng)緩沖液的活性
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1:
BalbBuffer 3.1:
CutSmart Buffer:
特性
CutSmart、重組酶、省時酶。
反應(yīng)條件
CutSmart 緩沖液,37℃。
熱失活:80℃ 20 分鐘。
濃度
10,000units/ml。
甲基化敏感性
對哺乳動物基因組DNA CpG甲基化敏感。
注意事項
由于 BsrBl的識別序列是非回文結(jié)構(gòu),當(dāng) DNA 經(jīng)過 BsrBl 切割后再連接時,僅有 50%的連接位點能夠重新產(chǎn)生 BsrBI 位點。
名稱:EcoRI-HF限制性內(nèi)切酶
貨號:SV0349
規(guī)格:50KU|50KU|10KU|10KU|5KU
在不同反應(yīng)緩沖液的活性:
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1:
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer:
特性:
CutSmart、重組酶、基因工程改造酶、省時酶、高保真酶。
反應(yīng)條件:
CutSmart 緩沖液,37℃。
熱失活:65℃ 20 分鐘。
濃度:
20,000和100,000units/ml。
甲基化敏感性:
對哺乳動物基因組DNA CpG甲基化敏感。
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