HR0371-1 考馬斯亮藍(lán)染色液
考馬斯亮藍(lán)染色液(Commassie Blue Staining Kit)采用了經(jīng)典的考馬斯亮藍(lán)染色方法,以考馬斯亮藍(lán)R250為染料,可用于SDS-PAGE或非變性PAGE等蛋白電泳凝膠的染色,或Western轉(zhuǎn)膜后PAGE膠上殘余蛋白的檢測??梢圆捎贸R?guī)染色方法或快速染色方法。...
使用方法:
1、電泳結(jié)束后,取凝膠放入適量考馬斯亮藍(lán)染色液中,確保染色液可以充分覆蓋凝膠。
2、置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng),室溫染色 1 小時(shí)或更長時(shí)間。
【注】:
● 具體的染色時(shí)間取決于凝膠的厚度和染色時(shí)的溫度。凝膠較厚,溫度較低,則染色時(shí)間宜適當(dāng)延長。凝膠較薄,溫度較高,則染色時(shí)間可以適當(dāng)縮短。通常染色至凝膠的顏色和染色液的顏色非常接近,在染色液中幾乎看不清凝膠時(shí),可以認(rèn)為已染色充分。染色2-4個(gè)小時(shí)或更長時(shí)間不會(huì)對最終的染色效果產(chǎn)生負(fù)面影響。
3、倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用。
4、加入適量考馬斯亮藍(lán)染色脫色液,確保脫色液可以充分覆蓋凝膠。
5、置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng),室溫脫色4-24小時(shí)。期間更換脫色液1-2次,直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去,并且蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。通常蛋白條帶在脫色1-2小時(shí)后即可出現(xiàn)。
【注】:
● 脫色期間可以在脫色液中加入一片吸水紙,可以使部分染料吸附在吸水紙上,加快脫色。
● 脫色時(shí)間過長也會(huì)導(dǎo)致蛋白條帶的顏色變淺。
6、完成脫色后,可以把凝膠保存在水中,用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會(huì)發(fā)生溶漲。如需避免溶漲,可以把膠保存在含20%甘油的水中。長期保存可以制備干膠??梢圆捎梦⒉t加熱的方法進(jìn)行快速染色。
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