大鼠ELISA試劑盒試驗(yàn)操作中,許多童鞋都經(jīng)歷過做了很多次ELISA，卻還是得不出好結(jié)果。其實(shí)實(shí)驗(yàn)方法雖然成熟，但是操作的時(shí)候一不留神，結(jié)果就可能毀于一旦?？纯茨阌袥]有忽略過以下這些關(guān)鍵點(diǎn)？

1、在細(xì)胞收集、總蛋白提取整個(gè)操作都要盡量在冰上進(jìn)行。提前開離心機(jī)預(yù)冷。

2、電泳用自來水沖洗干凈后，要再用蒸餾水沖洗，晾干。

3、灌膠前玻板一定要對(duì)齊夾緊。曾有過整個(gè)下午都在漏膠花膠的慘痛經(jīng)歷。

4、轉(zhuǎn)膜前，膜事先用甲醇激活，轉(zhuǎn)膜時(shí)zui好把轉(zhuǎn)膜槽放置在冰浴中進(jìn)行轉(zhuǎn)膜。

5、孵育的時(shí)候不要好幾張膜疊在一起摩擦摩擦，這對(duì)結(jié)果也會(huì)有影響。

6、用膠片曝光的時(shí)候一定要快進(jìn)快出，膠片可事先折個(gè)小角。膠片容易刮花，接觸的時(shí)候要特別小心，萬(wàn)一劃傷了目標(biāo)條帶真是心痛到說不出話。

7、要保證移液槍的準(zhǔn)確性，誤差不能超過2%。可用水和電子天平進(jìn)行確定。但zui好有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。

8、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。

9、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。

10、實(shí)驗(yàn)時(shí)，要使底物避光保存。

11、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。

大鼠ELISA試劑盒試驗(yàn)操作中所要求的條件是比較嚴(yán)格的，無論是對(duì)實(shí)驗(yàn)的硬件條件還是對(duì)實(shí)驗(yàn)的操作人員的技術(shù)要求，都是如此。上面所提到的就是一些在進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí)不容忽視的關(guān)鍵點(diǎn)。