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基因組核酸和Rnase清除:核糖核酸酶

發(fā)布時間:2020-05-15瀏覽次數(shù):1136返回列表

    核酸分解的第1步是水解核苷酸之間的磷酸二酯鍵,在高等動植物中都有作用于磷酸二酯鍵的核酸酶。不同來源的核酸酶,其專一性、作用方式都有所不同。有些核酸酶只能作用于RNA,稱為核糖核酸酶(RNase)。



    催化RNA水解的一種核酸內(nèi)切酶。反應(yīng)產(chǎn)物是單核苷酸和寡核苷酸。不同核糖核酸酶催化產(chǎn)物的低聚核苷酸組成有差別。核糖核酸酶T1使之產(chǎn)生單核苷酸和以3'-鳥苷酸為組成的或末端為3'-鳥苷酸的低聚核苷酸。核糖核酸酶T2使之產(chǎn)生單核苷酸和以3'-腺苷酸為組成的或末端為3'-腺苷酸的低聚核苷酸。

    大部分的核糖核酸酶需要二價陽離子作為輔因子(例如Ca,Mg等)。因此活性可因乙二胺四乙酸(EDTA)的存在而阻斷。胰核糖核酸酶是3'-嘧啶核苷酸由紅酵母發(fā)酵液提制而得的核糖核酸酶,其藥用油膏可局部外用于治療外傷及關(guān)節(jié)疼痛。

    有催化活性的核糖核酸(RNA)。是1981年切赫(T.Cech)zui先發(fā)現(xiàn)的,以后由他命名,尚無統(tǒng)一的中文譯名。和酶(蛋白質(zhì)催化劑)相比,細(xì)胞內(nèi)的RNA催化劑是少的?,F(xiàn)在已知的幾十種天然RNA催化劑的大部分參與RNA的加工和成熟。按它們的作用方式可分為剪切型(把RNA前體的多余部分切除),和剪接型(把RNA前體的內(nèi)含子部分切除并把不連續(xù)的外顯子部分連接起來)。根據(jù)所作用的底物不同,又可分成自體催化和異體催化兩類。大多數(shù)RNA催化劑以自身為底物進(jìn)行自體催化,可以是自我剪切,也可以是自我剪接。RNA催化劑比酶的催化效率低,有的RNA催化劑具有多種酶的功能。如原生動物四膜蟲的rRNA前體的內(nèi)含子序列具有核糖核酸酶等5種酶的活性,其水解RNA的速率為每分鐘兩次,而胰RNA酶的作用速率則為每秒鐘數(shù)千次。切赫和阿爾特曼(S.Altman)因?qū)NA催化劑研究的突出貢獻(xiàn),共獲1989年度諾貝爾化學(xué)獎。

    1.由紅霉素產(chǎn)生的蓖的發(fā)酵液提取。

    2.以牛胰為原料,稀硫酸勻漿后用硫酸銨分級沉淀,再經(jīng)重結(jié)晶、羧甲基纖維素柱層析得產(chǎn)品。

    3.以牛胰為原料稀酸抽提后用硫酸銨分級沉淀,在乙醇中重結(jié)晶制取