液相操作中，有一些小細節(jié)上的誤操作在精益求精的實驗室人看來是要盡可能避免的，細節(jié)雖小，影響很大。古朵生物這就帶各位小伙伴們看一看，這些錯誤你們有犯過嗎？犯過不怕，記得改正哦~

加入有機相之后再測量流動相的PH值

作為液相色譜的基礎(chǔ)，流動相的各項參數(shù)是保障實驗質(zhì)量的重中之重，特別是PH值。通常情況下對流動相PH值的測量是測量水相中的PH值參數(shù)，而在加入有機相后PH測量的PH值是會產(chǎn)生誤差的。因為每一次加入的有機相并不能保證完全的同質(zhì)同量，從而影響實驗的準(zhǔn)確度。

測量流動相的PH值，是測量水相中的PH值參數(shù)。有機相加入之后PH值參數(shù)的測量就和之前有誤差。

緩沖鹽使用不當(dāng)

在流動相中，加入緩沖鹽可以控制和修正流動相中的PH值變化。樣品的機制，空氣中的CO2等氣體以及水中的雜質(zhì)都能夠造成流動相PH值變化進而影響樣品的保留、峰形、峰面積參數(shù)。而每一種緩沖鹽都只能在一定的PH值范圍內(nèi)提供了佳的pH穩(wěn)定性。而在這個范圍外，該緩沖鹽在抵抗pH值變化方面是無效的。所以需要在流動相中加入合適的緩沖鹽，要么在正確的范圍內(nèi)使用緩沖鹽，要么選擇一個能夠完全覆蓋所需pH值的緩沖鹽。

后，緩沖鹽的添加也是具有一定的要求的，如果將水相的緩沖溶液加入到有機相中，會大大增加緩沖鹽析出的風(fēng)險。緩沖鹽的析出在初期可能并不明顯，但會對儀器的各個部件都會產(chǎn)生一定影響。長此以往不僅會導(dǎo)致實驗結(jié)果不準(zhǔn)確，會有可能導(dǎo)致儀器損傷甚至損壞。

直接用純有機溶劑沖系統(tǒng)

如果之前的方法在B通道使用緩沖溶液，而這次沒有經(jīng)過調(diào)查就直接在B通道使用了純的有機溶劑，那么就會造成該通道緩沖鹽析出、出現(xiàn)堵塞等風(fēng)險。

僅使用超聲來給流動相脫氣

超聲脫氣有一定的脫氣作用，但完全脫氣的效果并不理想。

所以在此建議使用真空脫氣機進行在線脫氣。

梯度洗脫時從流動相比例從0%開始

現(xiàn)在的液相色譜能夠非常高效的進行在線脫氣和流動相混合。但是將梯度洗脫比例從0%開始，會有比較大的出現(xiàn)氣泡和沉淀的風(fēng)險。