新生牛血清蛋白檢測指標(biāo)有哪些?

  新生牛血清(Newborn Calf Serum)是來自剛出生~出生后2周內(nèi)的新生牛靜脈取血。經(jīng)大規(guī)?；旌虾蟪^濾制成成品，主要用于動物細(xì)胞培養(yǎng)，是醫(yī)藥生物技術(shù)產(chǎn)品的重要原材料之一，其質(zhì)量好壞直接影響細(xì)胞生長情況。

  總蛋白含量是新生牛血清需要檢查的指標(biāo)。它屬于化學(xué)成分的初步分析。有人統(tǒng)計過國產(chǎn)新生牛血清的蛋白含量1，在比較各產(chǎn)區(qū)各年份后，發(fā)現(xiàn)其含量在3.7%~4.4%之間。進(jìn)口新生牛血清并不與之完全一致。因為國內(nèi)的血清常采自奶牛，而國外的血清常采自肉牛。蛋白質(zhì)是新生牛血清的主要成分，在細(xì)胞培養(yǎng)中起著維持滲透壓、pH 值緩沖、物質(zhì)運輸和提供營養(yǎng)、促進(jìn)細(xì)胞粘附等重要作用。在胎牛血清中，其總蛋白含量要低。

  血紅蛋白含量也是新生牛血清一項重要檢測指標(biāo)。它是在血清運輸和加工過程中細(xì)胞裂解釋放到血清中的。之所以檢測主要是由于牛血清中血紅蛋白具有氧化性，其含量過高會引起羧基的產(chǎn)生和脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，從而導(dǎo)致生產(chǎn)細(xì)胞受損，也會增加下游純化處理的難度，給藥品質(zhì)量帶來安全隱患2。有報道血紅蛋白具有神經(jīng)毒性。

  使用時常見問題及解決方法：

  一、保存血清-好的方法?

  血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃若存放于4℃時，請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶，建議將無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。

  二、如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?

  將血清從冷凍箱取出后，先置于2-8℃冰箱使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

  三、如何避免沉淀物的產(chǎn)生?

  1.解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。

  2.解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生

  3.請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。

  4.血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。

  5.若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。

  四、血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?

  欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會阻塞過濾膜。

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