古朵新聞：Elisa 標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)問(wèn)題及解答

  酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)可用于檢測(cè)大分子抗原和特異性抗體等，具有快速、靈敏、簡(jiǎn)便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中。很多因素都能影響標(biāo)準(zhǔn)曲線的結(jié)果，其中就包括配制和操作。

  我是否可以改變標(biāo)準(zhǔn)品的配制?

  ◆ 不可以。用的稀釋液適當(dāng)稀釋的重組標(biāo)準(zhǔn)品如說(shuō)明書(shū)中所示。

  ◆ 混合和溶解標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)，應(yīng)避免起泡。

  ◆ 溶解后的標(biāo)準(zhǔn)品zui好靜置至少15分鐘(根據(jù)說(shuō)明書(shū))。在使用之前輕輕混勻，保證所有的固體已經(jīng)溶解。

  ◆ 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，確保所有的稀釋步驟已經(jīng)準(zhǔn)確完成。稀釋時(shí)注意及時(shí)geng換槍頭。在移液之前將稀釋液充分混合。

  洗滌方式怎樣影響我的標(biāo)準(zhǔn)曲線?

  ◆ 不完全的洗滌會(huì)降低測(cè)定性，導(dǎo)致不理想的標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)果。確保洗板機(jī)的正常工作，確保酶標(biāo)板各孔被充分洗滌卻不干燥。

  移液方式怎樣影響我的標(biāo)準(zhǔn)曲線?

  ◆ 不合理的移液操作會(huì)導(dǎo)致高CV值和不理想曲線。

  ◆ 在制作標(biāo)準(zhǔn)曲線的過(guò)程中，不正確的移液方式會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的稀釋?zhuān)瑥亩瑰e(cuò)誤的數(shù)值進(jìn)入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，或者產(chǎn)生非線性曲線。確保移液器正常工作。每孔中的液體體積不等可能就是移液器失靈或者槍頭使用不當(dāng)所致。

  測(cè)定多個(gè)酶標(biāo)板時(shí)是否可以使用同一條標(biāo)準(zhǔn)曲線?

  ◆ 在測(cè)定不同板中的樣品時(shí)，每一個(gè)板都對(duì)應(yīng)一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。技術(shù)錯(cuò)誤或者不同的孵育情況，環(huán)境條件都會(huì)引起酶標(biāo)板之間產(chǎn)生不同結(jié)果。一條標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定的樣品值必需是在相同環(huán)境下產(chǎn)生的，否則就是無(wú)效值。

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