古朵快訊：緩沖液Tris(77-86-1)與磷酸鹽緩沖液之間的對(duì)比

  Tris和磷酸鹽都是很常用的緩沖液，它們有相同的地方也有很多不同的地方，如何能在使用時(shí)正確分辨和選擇，這也是難倒了一批人。我們今天就先從它們各自的應(yīng)用及使用環(huán)境講起。讓你能很直觀的感受到它們的區(qū)別。

  Tris緩沖液

  在電泳緩沖液中同甘氨酸構(gòu)成緩沖體系穩(wěn)定pH值;在凝膠中使用Tris-HCl緩沖體系穩(wěn)定pH值;被廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑;Tris緩沖液的低離子強(qiáng)度特點(diǎn)還可用于線蟲(chóng)的中間纖維的形成;在Tris鹽酸緩沖液中加入EDTA制成“TE緩沖液”，可用于DNA的穩(wěn)定和存儲(chǔ);將調(diào)節(jié)pH值的酸溶液換成乙酸，獲得“TAE緩沖液”，換成硼酸可獲得TBE緩沖液。這兩種緩沖液常用于核酸電泳實(shí)驗(yàn)中。

  磷酸鹽緩沖液

  一般的有活性的生物制劑都要用磷酸鹽緩沖溶液來(lái)稀釋。原因就是它具有鹽平衡、可調(diào)整適宜pH值的緩沖作用。蒸餾水不具有鹽平衡作用，會(huì)破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性;生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用，對(duì)完整的、有活性的物質(zhì)不能保證其在適條件下參與生物反應(yīng)，所以使用PBS是先選。當(dāng)然，有的生物活性物質(zhì)需要的條件比較高，就需要在平衡緩沖液中加入多的成分，維持合適的條件保證生物活性物質(zhì)保持其完整的特性。因此PBS主要用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，其緩沖范圍適宜在中性(7.0)。

  在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中要慎重地選擇緩沖溶液，不僅要考慮緩沖液的緩沖范圍，還要綜合考慮緩沖液的使用環(huán)境：

  1. 磷酸鹽緩沖溶液的緩沖范圍比較寬，但是它在pH7.5以上時(shí)緩沖能力很小;Tris本身呈堿性，可以只用Tris-HCl緩沖體系即可配制pH范圍由酸性到堿性的緩沖液，方法也較為簡(jiǎn)單，對(duì)于不同的實(shí)驗(yàn)，Tris還可以與其他物質(zhì)組成多種緩沖體系。

  2. 磷酸鹽緩沖溶液易與常見(jiàn)的Ca2+離子、Mg2+離子以及重金屬離子締合生成沉淀，同時(shí)會(huì)抑制某些生物化學(xué)過(guò)程以及多數(shù)酶的活性，包括激酶，磷酸化酶，脫氫酶等;相比之下Tris緩沖溶液對(duì)生物化學(xué)過(guò)程干擾很小，也不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。若反應(yīng)體系中存在金屬離子或者酶制劑，則以Tris緩沖溶液為較優(yōu)選擇。

  3. Tris緩沖液的pH值受溶液濃度影響較磷酸鹽緩沖溶液大，同樣稀釋十倍，磷酸鹽緩沖溶液的pH值變化小于0.1，而Tris緩沖液的pH值變化則大于0.1。因此對(duì)于體積變化較大的反應(yīng)體系，則應(yīng)慎重使用Tris 緩沖液。

  4. 另外，Tris緩沖溶液受環(huán)境影響較大。一般來(lái)說(shuō)，溫度每升高一度，pH值下降0.03; 同時(shí)其易吸收空氣中的CO2，所以配制的緩沖液要蓋嚴(yán)密封。

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