人白細胞介素（IL-17）ELISA檢測試劑盒的試驗步驟

  用 途：

  人IL-17 ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、緩沖液中細胞上清液及各種體液中的IL-17 。本試劑盒可以檢測天然和重組的IL-17 。本試劑盒于科研、而非用于臨床診斷。

  試驗原理：

  人IL-17 試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知IL-17 濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將IL-17 和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IL-17 的濃度呈比例關(guān)系。

  自備材料

  蒸餾水。

  加樣器：5ul、10 ul、50 ul、100 ul、200、500 u、1000lul。

  振蕩器及磁力攪拌器等。

  人白細胞介素（IL-17）ELISA檢測試劑盒

  安全性

  此試劑盒的人血制品中的HbsAg、和抗HIV為陰性，但沒有實驗室可*保證此血制品不會傳染肝炎、AIDS或其它傳染病，依據(jù)當?shù)氐陌踩珬l例處理本試劑盒里的成份及血清和血漿等樣品。

  避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

  實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

  不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

  操作注意事項

  試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。

  實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

  不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

  使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

  使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

  洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。

  底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。

  加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

  按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

  人白細胞介素（IL-17）ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法

  血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

  血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

  細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

  保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

  人白細胞介素-17ELISA檢測試劑盒

  操作步驟

  使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。

  根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

  加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。

  甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作四次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

  每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

  甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作四次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

  每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育15分鐘。避免光照。

  取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。

  在450nm波長處測定各孔的OD值。

  人白細胞介素（IL-17）ELISA檢測試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。