古朵技術(shù)分享：免疫組化和免疫熒光的區(qū)別
 

  免疫組化和免疫熒光都經(jīng)過免疫原，原理相似，只是顯色劑不同，免疫熒光是免疫組化技術(shù)之一。

  1、免疫組化是應用免疫學的基本原理，即抗原和抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學反應確定組織細胞中的抗原，使標記有抗體的顯色試劑顯色，并對其進行定位、定性和相對定量研究。在免疫組化過程中，常用的顯示劑包括熒光素、酶、金屬離子或同位素。

  2、免疫熒光是一種不會影響抗原和抗體活性的熒光色素，被標記在抗體或抗原上，然后與其對應的抗原或抗體結(jié)合，在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)特異性的熒光反應。免疫熒光是免疫組化技術(shù)之一，具有特異性強、靈敏度高、速度快的特點。但相對結(jié)果判斷的客觀性不足，技術(shù)程序復雜。

  免疫組化與免疫熒光的真正目的均為明確病理診斷，以便患者獲得治療。

  請問你曾經(jīng)被IHC、ICC和IF所困擾過嗎?

  在實驗中，有沒有一種感覺，就是對免疫組化(IHC)，免疫細胞(ICC)，以及免疫熒光(IF)傻傻分不清，那么今天我們就來討論一下這三者的區(qū)別，先貼圖上來以便有個大致的區(qū)分。

  從圖中我們可以看出，免疫檢測技術(shù)可以根據(jù)報告標簽的不同，分為免疫化學和免疫熒光兩類，而根據(jù)樣品類型不同，可以分為組織和細胞檢測技術(shù)。因此，才會延伸出三個相近的概念。

  為了好的區(qū)分這三個概念，我們還可以根據(jù)他們的英文詞根來分析一下，他們的英文名分別是免疫組織化學Immunohistochemistry (IHC)，免疫細胞化學Immunocytochemistry

  (ICC)，免疫熒光 Immunofluorescence (IF)。

  詞根分析：

  Immuno-指的是免疫技術(shù)(例如，抗體和抗原的結(jié)合)

  Histo-指的是組織(細胞以及它周圍的細胞外基質(zhì))

  Cyto-指的是細胞(不包含細胞外的基質(zhì))

  Chemistry-在這里指的是化學檢測方法(例如，顏色的變化)

  Fluorescence-對被激發(fā)的熒光團的檢測

  通過對詞根的解釋，相信你在心中不再迷茫了吧。

  這三個應用技術(shù)都屬于免疫技術(shù)，都是將抗原與抗體的結(jié)合可視化，即通過一定的方法可以直接看到實驗結(jié)果。而常用的方法就是化學顯色和熒光顯色。如果報告標簽是酶促的，就是免疫化學，如果是熒光的，就是免疫熒光。

  其實我們糾結(jié)免疫熒光的一個原因還在于免疫熒光的英文名字Immunofluorescence (IF)，但若是寫成免疫組織熒光(IHF)或是免疫細胞熒光(ICF)，那我們是不是就豁然開朗了。雖然這兩個詞匯在英文文獻中應用的還不是很廣泛，但不是我自己杜撰的哦，已經(jīng)有些學者在使用了，規(guī)范化應該也只是時間的問題。

  可能文字描述還是有些晦澀難懂，那我們就直接上圖吧。先不看下面答案，僅從幾張圖片，你能明白哪張圖代表哪種應用嗎?

  A免疫組織化學：兔EGFR單克隆抗體(10001-R043-50)—人胎盤

  B 免疫細胞化學：兔α微管蛋白單克隆抗體抗—MEF1細胞

  C免疫熒光組織：兔Cdk5單克隆抗體—雞腦組織

  D免疫熒光細胞：兔JNK2/MAPK9(10745-R004-50)單克隆抗體—人Hela細胞

  A圖和B圖是免疫化學(Immunochemistry)，這種應用是抗體檢測目標蛋白，發(fā)生了化學反應，然后顯色，根據(jù)樣本類型的不同，又可以分為免疫組織化學(A)和免疫細胞化學(B)。

  C圖和D圖是免疫熒光(Immunofluorescence)，這種應用根據(jù)抗體檢測目標蛋白然后通過偶聯(lián)熒光基團來顯色。根據(jù)樣本類型的不同可以分為免疫熒光組織(C)和免疫熒光細胞(D)。

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