古朵闡述：異常凝血酶原檢測試劑盒的試驗步驟

  異常凝血酶原檢測試劑盒

  二、注意事項：

  1. 此試劑為體外檢測試劑，效期內(nèi)使用，試劑應(yīng)視為傳染物，不同總批號的試劑不能混用。

  使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘，

  濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后，請于37℃孵育15分鐘。

  濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后，請于37℃孵育15分鐘

  若24小時內(nèi)進行實驗，標本可存放于2～8℃。不需及時實驗，標本-20℃保存，避免反復(fù)凍融。

  在反復(fù)清洗微孔板，并扣干微孔中的殘余液體，否則將降低度，造成吸光度偏離的假像。

  加樣完畢后，應(yīng)注意輕微搖動微孔反應(yīng)條，以便使孔中的液體充分混勻。

  試劑盒保存于2～8℃，請勿冷凍，有效期請見盒內(nèi)標示。

  三、實驗前準備：

  1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。

  2.準備各種實驗儀器及材料，如微量移液器，吸頭，醫(yī)用蒸餾水等

  3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液

  4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液

  5.用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品，按照1：100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中，充分混勻待用。)

  異常凝血酶原檢測試劑盒

  四、操 作 步 驟：

  1.取出酶標板，設(shè)空白孔，依照次序?qū)?yīng)分別加入100μl的標準品于空白微孔中(空白孔視為0號標準品，用醫(yī)用蒸餾水替代)

  2、分別標記樣品編號，加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中(不同的樣本采用不同的吸頭)。

  3、將酶標板置于37℃溫育30分鐘;

  4、將酶標板板取出，將其中的液體甩去，每個孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后，立即甩去液體;

  5、每個孔中加滿應(yīng)用洗滌液后，輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標板拍干。

  6、重復(fù)第5個步驟5次，在吸水紙上將酶標板拍干。

  7、在標準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標偶合溶液。

  8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。

  9、將酶標板取出，將其中的液體甩去，每個孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后，立即甩去液體。

  10、每個孔中再次加滿洗滌應(yīng)用液后，室溫輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標板拍干。

  11、重復(fù)第5個步驟5次，在吸水紙上將酶標板拍干。

  12、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。(A液、B液采用不同的吸頭加樣)

  13、將酶標板置于37℃避光溫育反應(yīng)15分鐘。

  14、每個微孔中加入50μl的終止液，輕輕振蕩混勻。

  15、在酶標儀上，450nm處測定OD; 顯色后，15分鐘內(nèi)進行測定。

  16、根據(jù)制備的標準曲線，計算樣本含量

  異常凝血酶原檢測試劑盒

  異常凝血酶原檢測試劑盒

  五、結(jié) 果 判 斷:

  1. 儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值;

  2、檢測值范圍：0-160mIU/ml

  3、敏感度：1.0 mI

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