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MRS培養(yǎng)基的配制如何避免出現(xiàn)異常情況?

發(fā)布時(shí)間:2017-10-31瀏覽次數(shù):1841返回列表

    MRS培養(yǎng)基的配制如何避免出現(xiàn)異常情況?在配制過程中,從一開就要注意,主要從幾點(diǎn)考慮:
一、溶化
    一般應(yīng)放在玻璃器皿或搪瓷齊內(nèi).加入蒸餾水,隔水加熱以促其溶解,加熱時(shí)應(yīng)經(jīng)常攪拌,防止焦結(jié),待其溶解后補(bǔ)足水分。
二、培養(yǎng)基的分裝
    大批量配制時(shí)使用的自動(dòng)分配器須經(jīng)校準(zhǔn)和確認(rèn).每次使用前后,均要對分配器的管道系統(tǒng)進(jìn)行沖洗,在分裝無菌培養(yǎng)基前,則要采用無菌硅膠管。
在使用干燥培養(yǎng)基時(shí),先將蒸餾水按定量加入容器中,然后稱取一定量培養(yǎng)基干粉放入水中,靜置10—15min,攪拌,振蕩,或延長時(shí)間以促進(jìn)溶解,一般不要熱,必要時(shí)加熱,但時(shí)間不宜過長,溫度不宜過高,避免某些營養(yǎng)成分被破壞。
三、校正酸堿度(調(diào)節(jié)pH)
    培養(yǎng)基必須有適當(dāng)?shù)膒H.因此測定pH是培養(yǎng)基配制過程中的重要步驟之一,測定pH的標(biāo)準(zhǔn)溫度為25士2℃.調(diào)節(jié)pH可用無菌的 1mol/l氫氧化鈉溶液或10%碳酸鈉溶液、1mol/l鹽酸溶液.當(dāng)調(diào)節(jié)緩沖液的pH時(shí),宜用6mol/l磷酸或10mol/l氫氧化鉀溶液.滅菌后 的pH會(huì)比滅菌前的pH升高或降低,一般高壓滅菌前培養(yǎng)基的pH會(huì)比終pH調(diào)高0.2左右,滅菌后基本合適。
    因此對培養(yǎng)基、緩沖液、試劑在滅菌前后的 pH均進(jìn)行測定,并記下每次pH的測定結(jié)果,有助于積累數(shù)據(jù)考察每種培養(yǎng)基、緩沖液、試劑對滅菌程序的耐受性,從而指導(dǎo)滅菌前pH的調(diào)節(jié)。干燥培養(yǎng)基一般已校正過pH,用時(shí)也必須再驗(yàn)證.測定時(shí),一般用指示劑滴入培養(yǎng)基觀察其顏色的變化,或用pH計(jì)校正,如與所需pH不符,可用以上的酸或堿液加以校正.調(diào) 整pH后要加熱過濾,使培養(yǎng)基澄清。