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人喉癌細胞

發(fā)布時間:2016-10-17瀏覽次數(shù):978返回列表

人喉癌細胞

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動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)

節(jié) 大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用簡介

通過大規(guī)模體外培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)哺乳類動物細胞是生產(chǎn)生物制品的有效方法。2060-70年代,就已創(chuàng)立了可用于大規(guī)模培養(yǎng)動物細胞的微載體培養(yǎng)系統(tǒng)和中空纖維細胞培養(yǎng)技術(shù)。近十數(shù)年來,由于人類對生長激素、干擾素、單克隆抗體、疫苗及白細胞介素等生物制品的需求猛增,以傳統(tǒng)的生物化學技術(shù)從動物組織獲取生物制品已遠遠不能滿足這一需求。隨著細胞培養(yǎng)的原理與方法日臻完善,動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)趨于成熟。人喉癌細胞

所謂動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)(large-scale culture technology)是指在人工條件下(設(shè)定ph、溫度、溶氧等),在細胞生物反應(yīng)器(bioreactor)中高密度大量培養(yǎng)動物細胞用于生產(chǎn)生物制品的技術(shù)。目前可大規(guī)模培養(yǎng)的動物細胞有雞胚、豬腎、猴腎、地鼠腎等多種原代細胞及人二倍體細胞、cho(中華倉鼠卵巢)細胞、BHK-21(倉鼠腎細胞)、Vero細胞(非洲綠猴腎傳代細胞,是貼壁依賴的成纖維細胞)等,并已成功生產(chǎn)了包括狂犬病疫苗、口蹄疫疫苗、甲型肝炎疫苗、乙型肝炎疫苗、紅細胞生成素、單克隆抗體等產(chǎn)品。

在過去幾十年來,該技術(shù)經(jīng)有了很大發(fā)展,從使用轉(zhuǎn)瓶(roller bottle) 、CellCube等貼壁細胞培養(yǎng),發(fā)展為生物反應(yīng)器(Bioreactor)進行大規(guī)模細胞培養(yǎng)。代細胞培養(yǎng)技術(shù)核心問題是難以產(chǎn)業(yè)化或者說是規(guī)?;a(chǎn):一是在工藝生產(chǎn)時不能大規(guī)模制備產(chǎn)品;二是非批量生產(chǎn)容易導(dǎo)致產(chǎn)品質(zhì)量的不均一性;三是難以對同批生產(chǎn)進行生產(chǎn)和質(zhì)量控制。

隨著生物技術(shù)的發(fā)展,迫切需要大規(guī)模的細胞培養(yǎng),特別是培養(yǎng)表達特異性蛋白的哺乳動物細胞,以便獲得大量有用的細胞表達產(chǎn)物。采用玻璃瓶靜置或旋轉(zhuǎn)瓶的培養(yǎng)方法,已不能滿足所需細胞數(shù)量及其分泌產(chǎn)物。因而必須為工業(yè)化生產(chǎn)一種新的技術(shù)方法。自70年代以來,細胞培養(yǎng)用生物反應(yīng)器有很大的發(fā)展,種類越來越多,規(guī)模越來越大,較常見的細胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器有空氣提升反應(yīng)器,中空纖維管反應(yīng)器,無泡攪拌反應(yīng)器及籃式生物反應(yīng)器等。八十年代以來,人們逐漸開始以生物反應(yīng)器培養(yǎng)代替鼠腹水的方法獲得單克隆抗體。

動物細胞是一種無細胞壁的真核細胞,生長緩慢,對培養(yǎng)環(huán)境十分敏感。采用傳統(tǒng)的生物化工技術(shù)進行動物細胞大量培養(yǎng),除了要滿足培養(yǎng)過程必需的營養(yǎng)要求外,有必要建立合理的控制模型,進行pH和溶氧(DO)的佳控制。細胞生物反應(yīng)器可通過微機有序地定量地控制加入動物細胞培養(yǎng)罐內(nèi)的空氣、氧氣、氮氣和二氧化碳四種氣體的流量,使其保持佳的比例來控制細胞培養(yǎng)液中的pH值和溶氧水平,使系統(tǒng)始終處于佳狀態(tài),以滿足動物細胞的生長對pH值和溶解氧的需要。如為提高或達到一定的溶氧水平可改變通入培養(yǎng)罐內(nèi)氣體中氧氣和氮氣的比例來實現(xiàn)控制DO值的目的。采用二氧化碳/碳酸氫鈉(CO2/NaHCO3)緩沖液系統(tǒng)來控制培養(yǎng)液的pH值是一種較好的方法。人喉癌細胞

SGC-7901*細胞,人胃癌細胞

SNU-1細胞,人胃癌細胞

SNU-5細胞,人胃癌細胞

SNU-638細胞,人胃癌細胞

HGC-27細胞,人胃癌(未分化)細胞

MKN-28細胞,人胃癌高轉(zhuǎn)移細胞

GIST-T1細胞,人胃腸間質(zhì)瘤細胞

SGC7901細胞,人胃腺癌細胞

HT-1080細胞,人纖維肉瘤細胞

Acc-2細胞,人涎腺腺樣囊性癌細胞

Acc-3細胞,人涎腺腺樣囊性癌細胞

A2 細胞,人腺樣囊性癌細胞

AM 細胞,人腺樣囊性癌(高轉(zhuǎn)移)細胞

HIC細胞,人小腸癌細胞

DMS153細胞,人小肺癌細胞

H128*細胞,人小肺癌細胞

H358細胞,人小肺癌細胞

H520細胞,人小肺癌細胞

H69細胞,人小肺癌細胞

HS77細胞,人小肺癌細胞

NCI-H209細胞,人小肺癌細胞

NCI-H2227細胞,人小肺癌細胞

NCI-H446細胞,人小肺癌細胞

SMC-1細胞,人胸膜瘤細胞

143TK 細胞,人胸腺激酶缺陷性系細胞

TF-1細胞,人血液白血病細胞

FaDu細胞,人咽鱗癌細胞

CCL-138 細胞,人咽頭癌胸水轉(zhuǎn)移細胞

Detroit 562細胞,人咽頭癌胸水轉(zhuǎn)移細胞

VUP 細胞,人眼脈洛膜惡性黑色素瘤細胞

OM431細胞,人眼脈洛膜惡性黑色素瘤細胞

SP 6.5細胞,人眼脈洛膜黑色素瘤細胞

C918細胞,人眼脈絡(luò)黑色素瘤細胞

BxPC-3細胞,人胰腺腺癌細胞

HPAC細胞,人胰腺腺泡上皮癌細胞

HaCaT細胞,人永生化表皮細胞

HL-60*細胞,人原髓白血病細胞

HL-60細胞,人早幼粒急性白血病細胞

CNE1-lmp1細胞,人轉(zhuǎn)lmp1基因鼻咽癌細胞

F2-2細胞,人轉(zhuǎn)基因鼻咽癌系細胞

AsPC-1細胞,人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細胞

C-33 A細胞,人子宮頸癌細胞

ME-180細胞,人子宮頸表皮癌細胞

現(xiàn)在,由于動物細胞培養(yǎng)技術(shù)在規(guī)模和可靠性方面都不斷發(fā)展,且從中得到的蛋白質(zhì)也被證明是安全有效的,因此人們對動物細胞培養(yǎng)的態(tài)度已經(jīng)發(fā)生了改變。許多人用和獸用的重要蛋白質(zhì)藥物和疫苗,尤其是那些相對較大、較復(fù)雜或糖基化(glycosylated)的蛋白質(zhì)來說,動物細胞培養(yǎng)是選的生產(chǎn)方式。60年代初,英國AVRI研究所在貼壁細胞系BHK21中將口蹄疫病毒培養(yǎng)成功后,從初的200ml和800ml玻璃容器開始,很快就放大到30L和100L不銹鋼罐的培養(yǎng)規(guī)模。使用的是基于Eagle's配方的培養(yǎng)基,補充5%成年牛血清和蛋白胨。1967年以后,Wellcome(現(xiàn)為Cooper動物保?。┘瘓F分布于歐洲、非洲和南美洲8個的生產(chǎn)廠商,應(yīng)用此項技術(shù)工業(yè)規(guī)?;a(chǎn)口蹄疫疫苗和獸用狂犬疫苗,已掌握了5000L的細胞罐大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)。人喉癌細胞

目前已實現(xiàn)商業(yè)化的產(chǎn)品有:口蹄疫疫苗、狂犬病疫苗、牛白血病病毒疫苗、脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗、乙型肝炎疫苗、皰瘡病毒疫苗、巨細胞病毒疫苗、α及β干擾素、血纖維蛋白溶酶原激活劑、凝血因子Ⅷ和Ⅸ、促紅細胞素、松弛素、生長激素、蛋白C、免疫球蛋白、尿激酶、激肽釋放酶及200種單克隆抗體等。其中,口蹄疫疫苗是動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)方法生產(chǎn)的主要產(chǎn)品之一。1983年,英國Wellcome公司就已能夠利用動物細胞進行大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)口蹄疫疫苗。美國Genentech公司應(yīng)用SV40為載體,將乙型肝炎病毒表面抗原基因插入哺乳動物細胞內(nèi)進行表達,已生產(chǎn)出乙型肝炎疫苗。英國Wellcome公司采用8000L Namalwa細胞生產(chǎn)α干擾素。英國Celltech公司用氣升式生物反應(yīng)器生α、β和γ干擾素;用無血清培養(yǎng)液在10000L氣升式生物反應(yīng)器中培養(yǎng)雜交瘤細胞生產(chǎn)單克隆抗體。美國Endotronic公司用中空纖維生物反應(yīng)器大規(guī)模培養(yǎng)動物細胞生產(chǎn)出免疫球蛋白G、A、M和尿激酶、人生長激素等。人喉癌細胞

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