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Hylone SH30396.03胎牛血清SH30396.03(加拿大源)出現(xiàn)顏色或沉淀的問題

發(fā)布時間:2017-08-14瀏覽次數(shù):949返回列表

Hylone SH30396.03胎牛血清SH30396.03(加拿大源)出現(xiàn)顏色或沉淀的問題

炎炎夏熱,暑期特惠,恰逢立秋時刻,素爾生物作為生物試劑優(yōu)質(zhì)供應商,GIBCO 10091-148(新西蘭)胎牛血清,批量到貨,質(zhì)量與原GIBCO10099-141 澳洲源血清同等質(zhì)量,價格可見!購買血清并有好禮相送,機會不多哦,趕快行動吧!

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1、問:我用的是四季青的胎牛血清,56℃30分鐘滅活后出現(xiàn)了白色少量絮狀沉淀,是不是污染?還能不能 再用?血清的生產(chǎn)日期是2006年7月(現(xiàn)在是2007年6月11日)。

答:應該問題不大。你可以取少量血清放入培養(yǎng)皿中,37℃過夜培養(yǎng)看看就知道是否污染了。血清中沉淀 物的出現(xiàn)有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在 血渭解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。 若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起 過濾。

2、問:我用MTT法測細胞的增殖,用DMSO裂解細胞,發(fā)現(xiàn)把DMSO加入到孔中就會形成乳白色(用的含胎牛血 清的1640培養(yǎng)基,由于沒有離板子的離心機,所以沒有去除培養(yǎng)基直接加的DMSO)。以前用含小牛血清的培養(yǎng)基沒有 看到有這種情況。該怎么解決?

答:為什么要用離心機離心呢?難倒你養(yǎng)的是懸浮細胞嗎?如果是貼壁細胞的話直接將MTT倒掉,再加DMSO 即可,我們就是這么做的,效果很好!并且測細胞的增殖的話如果不去掉MTT就加DMSO的話誤差應該很大!有時不一 定就是血清的原因,可能跟你的MTT放置的時間或以及其他成分有關(guān)!

3、問:(1)GIBCO胎牛血清500ml,今天解凍后沒有混勻直接分裝,結(jié)果使得前面的幾管是清亮的,后面就 帶有棕色的,不知有沒有影響?估計有什么影響?前面的成分好還是棕色的成分好???

答:肯定有。還是重新混合重新分裝,我覺得有效成分會集中在棕顏色部分。

問:(2)為什么會出現(xiàn)棕色呢?

答:血清中的棕色多一些可能是因為紅蛋白的含量高些的緣故吧。

問:(3)血清滅活之后可以存放嗎?我的是前天滅活的,但是沒有加到培養(yǎng)基里,而是放在冰箱里,那下次 可以直接用嗎?還是再次滅活啊?

答:當然可以,如果多的話,分裝后放在-20℃,下次用時再解凍,也不用再滅活。用一管拿一 管,少許血清可以放在4℃。分裝時還要注意不要裝得太滿,以免溢出污染。

Hylone SH30396.03胎牛血清SH30396.03(加拿大源)出現(xiàn)顏色或沉淀的問題關(guān)于心肌細胞元代培養(yǎng)的FBS問題:

 (1)1%的血清完全培養(yǎng)基可不可以,得看你胰酶的用量。但是在心肌細胞元代培養(yǎng)就不行。 10%FBS完全 培養(yǎng)基效果都不太好,開始心肌細胞元代培養(yǎng)需要高濃度的FBS20%左右,但這就有出現(xiàn)另一個問題,在FBS完全培 養(yǎng)基中,成纖維細胞呈細胞,須得在培養(yǎng)基加入適量的BrdU以抑制其生長,純化心肌細胞。

 (2)FBS的作用不僅僅是拿來中和胰酶,只是FBS中的一些蛋白質(zhì)如α-巨球蛋白等有抑制胰酶活性作用 。

 (3)元代心肌細胞培養(yǎng)的FBS使用,有講究:剛開始使用20%左右的高濃度的FBS,后逐漸遞減為無血清的 DMEM/F-12培養(yǎng)基培養(yǎng)。

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