Biotium 31000 EvaGreen qPCR

Biotium 31000 EvaGreen qPCR和HRM熒光定量PCR染料5*1ml

Biotium：GelRed(41003)、GelGreen(41005)、Biotium 31000 EvaGreen熒光定量PCR染料5*1ml

EvaGreen® 是一種用于實(shí)時(shí)定量 PCR （ qPCR ）的 DNA 結(jié)合染料。該染料的諸多優(yōu)點(diǎn)使它遠(yuǎn)勝于 SYBR Green I 。除了有相似的光譜特性， EvaGreen® 有三個(gè)主要特點(diǎn)使它區(qū)別于 SYBR Green I 。EvaGreen® 對 PCR 的抑制性遠(yuǎn)小于 SYBR Green I 。因此，使用 EvaGreen® 進(jìn)行的 qPCR 實(shí)驗(yàn)可以使用快速 PCR 步驟。同時(shí)， EvaGreen 在實(shí)驗(yàn)中可以使用較高的濃度，從而獲得遠(yuǎn)強(qiáng)于 SYBR Green I 擴(kuò)增信號。較高濃度的 EvaGreen 也消除了“染料重分布”的缺陷，使 EvaGreen 既可用于多重 PCR ，也可用于高分辨率（高清晰）熔解曲線分析（ HRM ）。該分析正被越來越多的用于 PCR 后的基因分型和異源雙鏈分析 。由于 SYBR Green I 對 PCR 的抑制性，從而要求其使用濃度必須很低，因此 SYBR Green I 無法解決由低濃度造成的染料重分布問題，既不能用于多重 PCR 也不能用于 HRM 。同時(shí)，染料重分布問題也可能影響常規(guī)熔解曲線的可靠性，因?yàn)榈腿埸c(diǎn)的 DNA 鏈可能由于這種原因而無法檢測到 。

SYBR Green I 核酸染料特點(diǎn)
高靈敏：至少可檢出20pg DNA，高于EB染色法25-100倍。
信噪比高：樣品熒光信號強(qiáng)，背景信號低。
操作簡單：無須脫色或沖洗。
適用范圍廣：可適用于多種電泳分析。
使用方便：不影響其它修飾酶作用。
經(jīng)濟(jì)：價(jià)格比銀染。

性：Gelred 獨(dú)特的油性和大分子量特點(diǎn)決定其不能穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，所以。實(shí)驗(yàn)證明，該染料的誘變性遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于EB。

靈敏度高：適用于各種大小片段的電泳染色，對核酸遷移的影響小于SYBR Green I。

穩(wěn)定性高： 適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠；室溫下在酸或堿緩沖液中其穩(wěn)定，耐光性強(qiáng)。

信噪比高：樣品熒光信號強(qiáng)，背景信號低。

操作簡單：與 EB 一樣，在預(yù)制膠和電泳過程中染料不降解；而電泳后染色過程也只需30 分鐘且無需脫色或沖洗 ，即可直接用紫外凝膠透射儀觀察。

適用范圍廣：可選擇電泳前染色（膠染法）或電泳后染色（泡染法）；適用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳；可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。

與EB有相同的光譜特性，無需改變?yōu)V光片及觀察裝置：標(biāo)準(zhǔn)的 EB 濾光片或 SYBR 濾光片都適用，使用與觀察EB相同的普通紫外凝膠透射儀觀察即可，在 300nm 紫外光附近可得到激發(fā)。但是Gelred不能被488 nm氬離子激光器或相似波長的可見光完全激發(fā)，因此不推薦使用此類激發(fā)裝置的成像系統(tǒng)。對于此類裝置，我們推薦您使用GelGreen，它和SYBR Green I的光譜相似，靈敏度相當(dāng)，但更加穩(wěn)定。